目录
- 1 蛋白质折叠
- 2 蛋白质折叠的过程
- ▪ 主要结构
- ▪ 二级结构
- ▪ 三级结构
- ▪ 四元结构
- ▪ 蛋白质折叠的驱动力
- 3 研究蛋白质折叠的实验技术
- ▪ X射线晶体学
- ▪ 荧光光谱法
蛋白质折叠
蛋白质折叠是物理过程，通过该蛋白链获得其天然 的三维结构中，构象即通常生物功能，以迅速和可再现的方式。这是一个物理过程，多肽从一个随机的线圈中折叠成其特征和功能性三维结构。当从mRNA序列翻译成氨基酸的线性链时，每种蛋白质都以未折叠的多肽或无规卷曲的形式存在。该多肽缺乏任何稳定的（持久的）三维结构。当多肽链由核糖体合成时，线性链开始折叠成其三维结构。即使在多肽链的翻译过程中，折叠也开始发生。氨基酸彼此相互作用，产生清晰的三维结构，即折叠的蛋白质，称为天然状态。最终的三维结构由氨基酸序列或一级结构（Anfinsen信条）确定。
正确的三维结构是功能是必需的，尽管功能蛋白质的某些部分可以保持展开，使得蛋白质动力学是重要的。无法折叠成天然结构通常会产生失活的蛋白质，但在某些情况下，错误折叠的蛋白质会具有修饰或毒性功能。据信几种神经退行性疾病和其他疾病是由错误折叠的蛋白质形成的淀粉样 蛋白原纤维的积累导致的。许多过敏是由于某些蛋白质折叠不正确引起的，因为免疫系统不会产生抗体对于某些蛋白质结构。
蛋白质的变性是从折叠到未折叠状态的转变过程。它发生在烹饪、烧伤、蛋白病和其他情况下。
折叠过程的持续时间视目标蛋白质而异。在细胞外进行研究时，最慢的折叠蛋白主要由于脯氨酸异构化而需要花费数分钟或数小时才能折叠，并且在过程完成之前必须经过许多中间状态，如检查点。另一方面，长度不超过一百个氨基酸的非常小的单结构域蛋白通常会在一个步骤中折叠。毫秒级的时间尺度是常态，最快的已知蛋白质折叠反应在几微秒内即可完成。
蛋白质折叠的过程
主要结构
蛋白质的主要结构及其线性氨基酸序列决定了其天然构象。特定氨基酸残基及其在多肽链中的位置是决定因素，蛋白质的某些部分紧密折叠在一起并形成其三维构象。氨基酸组成不如序列重要。然而，折叠的基本事实仍然是，每种蛋白质的氨基酸序列都包含指定天然结构和达到该状态的途径的信息。这并不是说几乎相同的氨基酸序列总是相似地折叠。构形也因环境因素而异。相似的蛋白质会根据发现的位置折叠不同。
二级结构
二级结构的形成是蛋白质呈现其天然结构所需要的折叠过程的xxx步。二级结构的特征是被称为α螺旋和β折叠的结构，由于它们被分子内的 氢键所稳定，因此折叠迅速，如Linus Pauling首次表征的。分子内氢键的形成为蛋白质稳定性提供了另一个重要的贡献。α螺旋是通过骨架的氢键结合形成螺旋形。β折叠片是一种骨架，骨架在其自身上方弯曲以形成氢键的形式。氢键在肽键的酰胺氢和羰基氧之间。存在反平行β折叠的片和平行β折叠的片，其中与平行片形成的倾斜的氢键相比，反平行β片中的氢键的稳定性更强，因为它具有理想的180度角的氢键。
三级结构
α螺旋和β折叠的薄片本质上可以是两亲的，或者包含亲水部分和疏水部分。二级结构的这种特性有助于蛋白质的三级结构，在该结构中会发生折叠，从而使亲水侧面向蛋白质周围的水性环境，而疏水侧面向蛋白质的疏水核心。二级结构在层次结构上让位于三级结构的形成。一旦蛋白质的三级结构通过疏水相互作用形成并稳定下来，两个半胱氨酸之间就可能形成二硫键形式的共价键残留物。蛋白质的三级结构涉及一条多肽链；然而，折叠的多肽链的其他相互作用导致四级结构的形成。
四元结构
三级结构可能会让位给某些蛋白质中的四级结构，这通常涉及已经折叠的亚基的“组装”或“共组装”。换句话说，多个多肽链可以相互作用形成功能完整的季蛋白。
蛋白质折叠的驱动力
折叠是一种自发过程，主要由疏水相互作用，分子内氢键的形成，范德华力引导，并且与构象熵相反。折叠的过程通常始于共翻译，使N末端的蛋白质的开始而折叠C-末端的蛋白质的部分仍然被合成由核糖体; 但是，蛋白质分子在生物合成过程中或之后可能会自发折叠。这些大分子可能被视为“自身折叠”，其过程还取决于溶剂（水或脂质双层）、盐的浓度、pH、温度、辅因子和分子伴侣的可能存在。
蛋白质的折叠能力会受到可能受限的弯曲角度或构象的限制。这些蛋白质折叠的允许角度用称为Ramachandran图的二维图进行描述，并以psi和phi允许旋转角度进行描述。
研究蛋白质折叠的实验技术
尽管可以通过突变研究得出有关蛋白质折叠的推论，但通常，用于研究蛋白质折叠的实验技术依赖于蛋白质的逐渐展开或折叠以及使用标准的非晶体学技术观察构象变化。
X射线晶体学
X射线晶体学是试图破译折叠蛋白质的三维构型的更有效和重要的方法之一。为了能够进行X射线晶体学分析，所研究的蛋白质必须位于晶格内。为了将蛋白质放入晶格中，必须有一种合适的结晶溶剂，在溶液中获得过饱和水平的纯蛋白质，并在溶液中沉淀出晶体。一旦蛋白质结晶，X射线束就可以通过晶格集中，这将使束衍射或向各个方向向外发射。这些射出的光束与封闭在其中的蛋白质的特定三维构型相关。X射线与周围蛋白质晶体晶格中各个原子周围的电子云相互作用，并产生可辨别的衍射图。只有通过将电子密度云与X射线的幅度相关联，才能读取此模式，并得出有关使该方法复杂化的相位或相角的假设。没有通过称为傅立叶变换的数学基础建立的关系因此，“相位问题”将使预测衍射图非常困难。诸如多重同构置换之类的新兴方法利用重金属离子的存在将X射线衍射成更可预测的方式，从而减少了涉及的变量数量并解决了相位问题。
荧光光谱法
荧光光谱法是研究蛋白质折叠状态的高度灵敏的方法。苯丙氨酸（Phe）、酪氨酸（Tyr）和色氨酸（Trp）这三种氨基酸具有固有的荧光特性，但由于它们的量子产率，实验上仅使用Tyr和Trp足够高以提供良好的荧光信号。Trp和Tyr都被280 nm波长激发，而只有Trp被295 nm波长激发。由于它们的芳香特性，经常发现Trp和Tyr残基完全或部分掩埋在蛋白质的疏水核中，两个蛋白质结构域之间的界面或寡聚蛋白质的亚基之间的界面。在这种非极性环境中，它们具有很高的量子产率，因此具有很高的荧光强度。一旦破坏蛋白质的三级或四级结构，这些侧链就会更暴露于溶剂的亲水环境中，并且其量子产率降低，从而导致荧光强度降低。对于Trp残基，其xxx荧光发射波长也取决于其环境。
通过测量荧光发射强度或xxx发射波长随变性值的变化，荧光光谱法可用于表征蛋白质的平衡展开。变性剂可以是化学分子（尿素、盐酸胍）、温度、pH、压力等。不同但不连续的蛋白质状态（即天然状态、中间状态、未折叠状态）之间的平衡取决于变性剂值。因此，它们的平衡混合物的整体荧光信号也取决于该值。这样就获得了一种将总蛋白信号与变性值相关的曲线。平衡展开的概况可以使人们能够检测和识别展开的中间体。Hugues Bedouelle已开发出通用方程式，以从这些轮廓中获得表征同聚或异聚蛋白，直至三聚体和可能的四聚体的展开平衡的热力学参数。荧光光谱可以与快速混合设备组合使用，以测量蛋白质折叠动力学， 生成人字形图并进行Phi值分析。
